دانشگاه تبریز پژوهش های کاربردی در گیاهپزشکی 2383-1855 5 1 2016 03 20 Purification and Analysis of the Antigenic Properties of the Expressed Cucumber mosaic virus Coat Protein in Escherichia coli تخلیص و بررسی ویژگی های آنتی ژنیک پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار بیان شده در باکتری Escherichia coli 93 102 5061 FA داود کولیوند استادیار بیماری شناسی گیاهی، گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان. نعمت سخندان بشیر دانشیار گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه تبریز. افشین رستمی دانشجوی دکتری بیماری شناسی گیاهی، گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان. پرویز پیرنیاکان دانش آموخته کارشناسی ارشد بیماری شناسی گیاهی، گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز . Journal Article 2016 09 05 <strong>چکیده</strong> تخلیص انواع پروتئین­های بیان شده­ی ویروسی با اهداف مختلف از جمله تولید آنتی­بادی­های چند همسانه­ای و تک همسانه­ای، مطالعه­ی ساختاری آنها، شناسایی توالی آمینو اسیدی و توالی پپتیدی با استفاده از انواع روش­های کروماتوگرافی، صورت می­پذیرد که عموماً کاربرد چنین روش­هایی مستلزم صرف هزینه­ی زیاد می­باشد. در این تحقیق سعی شد پس از بیان ژن پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار، تخلیص و خالص سازی پروتئین بیان شده مورد نظر از ژل پلی آکریل آمید انجام پذیرد. در همین راستا، پس از بیان ژن پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار در باکتری  <em>Escherichia</em><em> coli</em>، الکترفورز پروتئین­های استخراج شده از باکتری­ در ژل پلی آکریل آمید صورت گرفت که نتایج بدست آمده حاکی از تولید مطلوب پروتئین برای استخراج از ژل بود. پس از بیان ژن مورد نظر در حجم زیاد، پروتئین بیان شده در باکتری روی ژل پلی آکریل آمید الکترفورز گردید. پس از الکترفورز و تعیین محل نوار پروتئین بیان شده، محل مورد نظر از ژل بریده و تخلیص گردید. سپس،  پروتئین تخلیص شده از ژل به منظور ایمنی زایی به خرگوش تزریق شد و سرم ایمن شده پس از سپری شدن زمان مناسب استحصال شد و عیار آن مشخص گردید. این روش با توجه به هزینه و امکانات قابل دسترس، در مقایسه با سایر روش­های تخلیص از جمله کروماتوگرافی، کم هزینه و کارا می باشد. همچنین نتایج دیبا و وسترن بلات با استفاده از پروتئین تخلیص شده و ایمن­زایی خرگوش نشان داد که از این پروتئین میتوان به منظور تولیدآنتی سرم و آنتی بادی برای ردیابی ویروس موزاییک خیار استفاده نمود. https://arpp.tabrizu.ac.ir/article_5061_3c514d351f19e0928ae8ef91595039be.pdf